bio-rad伯乐 凝胶过滤

分子量排阻层析（SEC）又称凝胶过滤层析，它根据分子量大小来分离分子。凝胶基质由大小孔隙的球形 小珠组成，不同分子量的分子从孔中排阻通过，发生分离。小分子进入孔内，会延滞它们通过层析柱，而大分子避 开孔，洗脱入层析柱外水体积。因此，样品根据分子量大小进行分离，并依照分子量递减顺序洗脱。

依据层析目的和所需的分辨率来选择操作条件和介质。分子量排阻层析中一种常规的方法为基团分离，包括：

脱盐— 目标分子洗脱出来，而小分子保留在凝胶孔内。为了获得理想的分离，基质的分子量排阻限度应比目 标分子小。

分分离— 一定分子量范围的分子在凝胶基质内分离。使用这种方法时，目标分子应当在凝胶的分分离范 围以内。

分子量排阻层析常规应用包括蛋白分分离及分子量确定、核酸分离、质粒纯化和多糖分分离。

层析分辨率取决于颗粒大小、孔径大小、流速、层析柱尺寸和样品体积。通常，低流速（2–10 cm/hr）、细长 柱、小颗粒凝胶、小样品体积（总床体积的1–5%）、2 倍的分子量差异以及相同的溶液粘度，可以获得高分辨率。 如果用于脱盐，样品体积则可达到总床体积的30–40%，并可使用短粗柱。

关于抗体纯化应用指南，请索取资料# 1802。蛋白应用指南请索取资料# 1801。

瓶装分子量排阻层析介质

Bio–Gel P 聚丙烯酰胺微球体由丙烯酰胺和N,N'– 甲叉双丙烯 酰胺共聚而成，用于高分辨率的凝胶过滤。Bio–Gel P 凝胶具有以 下特点：

• 可分离不同大小的分子，分子量范围从100至100,000
• 本质上虽是非离子，但极度亲水
• 为敏感化合物提供有效而温和的凝胶过滤
• 特殊的合成组份，不象右旋糖苷和琼脂糖易滋生微生物或过滤碳水化合物
• 在室温、pH 2–10条件下操作，可高压灭菌（pH 5.5–6.5）。流速和分辨率随着温度的递增（4–80°C）而增加

Bio–Gel P凝胶可与弱有机酸、8M尿素、离液剂、去垢剂和易混有机溶剂兼容。酒精（高20% v/v）可以提高 核苷酸、多肽和丹宁酸的溶解度，而不改变凝胶的排阻特性。同样可以使用甲酰胺溶剂，Bio–Gel P凝胶可在该溶剂 内完全溶胀。

Bio–Gel P–6DG凝胶的大分子量排阻为6,000，是专为脱盐和缓冲液置换而设计。它可迅速获得结果，且回收 率高、样品稀释度小。凝胶的疏水性确保与样品分子间几乎不发生交互作用。

更多信息，请索取资料# 2068。

Bio–Beads S–X 介质是中性、多孔的聚苯乙烯二乙烯基苯微球体，用于亲脂性多聚物和有机洗脱溶质的分子量 排阻层析。分子量400–14,000 的排阻范围，可用于分离分子量小的有机多聚物和其它疏水物质，如杀虫剂、灭鼠 剂、多环芳香化合物和不饱和脂类。使用不同的洗脱剂会影响排阻。用Bio–Beads S–X 介质分离需要可流动的 洗脱剂，因此，该介质必须在层析柱内使用。洗脱溶剂的芳香性越强，排阻越高。介质可与苯、甲苯、二甲苯、 四氯化碳、二甲基甲酰胺、酮、芳香族类、二氯甲烷、o–二氯(代)苯、全氯乙烯、四氢呋喃和三氯(代) 苯等试剂兼容。

与交联度相关的推荐流速：

• 1% 交联度树脂仅用于重力流层析
• 3% 交联度树脂可承受背压20 bar 或300 psi，5 ml/in 的流速
• 8% 和12% 交联度树脂可承受多达33 bar 或500 psi 的背压

预装分子量排阻层析柱

为方便用户，我们提供填装Bio–Gel P–6 介质的预装Econo–Pac 滤柱（1 ml 和5 ml）。由于Econo–Pac 滤柱无 需制备凝胶或装柱，简化了层析过程。滤柱可与BioLogic 系统、蠕动泵或任何层析系统配合使用，并可与注射器 连接进行简单洗脱。

同时提供填装有其它介质的Econo–Pac 滤柱；离子交换滤柱，羟基磷灰石滤柱，亲和滤柱， 疏水作用滤柱。

Bio–Sil 和Bio–Silect 层析柱是以硅材料为基质，用 于样品成分分离、脱盐或缓冲液置换和分子量或分子 常数估算。

硅材料的分子量排阻层析柱应用于分离pH 2–8 的多肽、蛋 白和核酸。分析柱有不锈钢（Bio–Sil）和生物兼容的PEEK塑料（Bio– Silect）两种。Bio–Sil 和Bio–Silect SEC 柱填装了5μm 亲水结合相硅，蛋白 载量0.01–1.5 mg。为了分离洗脱峰较接近的蛋白，获得更高的分辨率，可 串联使用2 个300 mm SEC 柱、工作压>1000 psi 的系列层析系统。

该层析柱确保在70°C 下的热稳定性以及化学稳定性。介质在甲醇、 乙醇、氰化甲烷、DMSO 和THF 等有机溶剂中稳定。

更多信息，请索取资料# 1737。